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T7核酸内切酶
T7 Endonuclease I (T7 Endo I, T7EI)，即T7核酸内切酶I，是一种比较特殊的DNA内切酶，能识别并切割不完全配对的DNA(non-perfectly matched DNA)、十字型结构DNA(cruciform DNA structures)、Holliday结构或交叉DNA(Holliday structures or junctions)和异源双链DNA(heteroduplex DNA)。T7EI切割的位点位于错配碱基5’端的第一、第二或第三个磷酸二脂键。此外，T7EI也能以很慢的速度切割含有缺刻的双链DNA(nicked double-stranded DNA)。本产品常用于CRISPR/Cas9等导致的基因突变的鉴定。
- 商品名称： T7核酸内切酶
- 商品编号： RTBR23-079
- 产品描述
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RTBR23-079
T7核酸内切酶
250 U
288.00元
T7 Endonuclease I (T7 Endo I, T7EI)，即T7核酸内切酶I，是一种比较特殊的DNA内切酶，能识别并切割不完全配对的DNA(non-perfectly matched DNA)、十字型结构DNA(cruciform DNA structures)、Holliday结构或交叉DNA(Holliday structures or junctions)和异源双链DNA(heteroduplex DNA)。T7EI切割的位点位于错配碱基5’端的第一、第二或第三个磷酸二脂键。此外，T7EI也能以很慢的速度切割含有缺刻的双链DNA(nicked double-stranded DNA)。本产品常用于CRISPR/Cas9等导致的基因突变的鉴定。
包装清单：
产品编号 产品名称 包装 1 T7 Endonuclease I (10U/µl) 25µl 2 10X Reaction Buffer 0.2ml 3 Control template (100ng/µl) 10µl — 说明书 1份 保存条件：
-20℃保存，至少一年有效。
注意事项：
1、T7EI是一种依赖于底物结构并进行选择性酶切的酶，其对不同的DNA底物显示出不同的反应活性。因此，切割特定底物时，必须控制好酶量和反应时间。
2、反应温度超过42℃时，会增加其非特异性酶切的活性；而反应温度超过55℃则会降低其酶活性。
3、本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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使用说明：
1．按下表配置反应体系(以20μl 体系为例)。通常PCR产物推荐使用5μl，过多的PCR产物由于PCR buffer的存在可能会干扰后续的酶切反应。Component Positive Control Negative Control Control template PCR product(约200ng) 5 μl 5 μl 2 μl 10 x T7 Endonuclease I Reaction Buffer 2 μl 2 μl 2 μl Nuclease-free Water 12 μl 12 μl 15 μl 2．退火反应：
Step Temperature Time 1 95℃ 5min 2 95℃–85℃ –2℃/sec 3 85℃–25℃ –0.1℃/sec 4 4℃ Hold 3．在上述19μl退火后的体系中加入1 μl T7EI，37℃孵育15-30min。通常孵育15min已经足够，如果希望确保获得更好的酶切效果可以孵育30min。
4．85℃加热15min或加入1.5 μl的0.25 M EDTA终止酶切反应。
5．将酶切产物进行琼脂糖凝胶电泳，拍照观察，并分析酶切效果。
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