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通用反转录试剂盒
本试剂盒适用于各种RNA制品的反转录反应。它采用M-MLV进行反转录反应,能够获得较长的反转录产物用于后续的PCR扩增和分子克隆实验。
- 商品名称: 通用反转录试剂盒
- 商品编号: RTBK17-075
- 产品描述
- 产品说明
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产品编号
产品名称
产品包装
产品价格
RTBK17-075
通用反转录试剂盒
100T/盒
2600.00元
产品组成:
组分
50T
100T
M-MLV(200U/μL)
50μL
50μL×2
5×M-MLV Buffer
200μL
400μL
Oligo(dT)16(10μM)
100μL
200μL
RNasin(40U/μL)
25μL
50μL
dNTPs(10mM)
50μL
100μL
RNase-free ddH2O
1mL
1mL×2
保存:-20℃,避免反复冻融,有效期1年。
注意事项:
1. 用于cDNA合成反应的相关试剂和耗材尽可能用DEPC进行处理,并在高压灭菌后使用。有些试剂不能高压灭菌时,首先用经过灭菌的器具、水等配制溶液后,再将溶液进行过滤除菌处理。
2. 试剂盒的各组分应在-20℃保存,避免反复冻融,有效期12个月。
3. RNA样品要避免反复多次冻融,应使RNA在冰浴中处于融化状态。
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使用说明:
1. 在冰浴的无RNase的离心管中加入如下反应成分:
成分
用量
模板
总RNA
1~5μg
mRNA
50~500ng
引物
Oligo(dT)16
2μL
基因特异性引物
2pmol
RNase-free ddH2O
至14.5μL
2. 70℃保温5min后迅速在冰上冷却2min,简短离心收集反应液后加入以下各组分:
成分
用量
5×M-MLV Buffer
4μL
dNTPs
1μL
RNasin
0.5μL
M-MLV
1μL
3. 42℃温浴60min,如果是用随机引物,请先将离心管置25℃温浴10min,再42℃温浴60min。
4. 95℃加热5min终止反应,置冰上进行后续实验或-20℃保存。
5. 若用于后续PCR扩增,用RNase-free ddH2O将反应体系稀释到50μL,取2~5μL作为PCR反应模板。
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