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通用反转录试剂盒

本试剂盒适用于各种RNA制品的反转录反应。它采用M-MLV进行反转录反应,能够获得较长的反转录产物用于后续的PCR扩增和分子克隆实验。

  • 商品名称: 通用反转录试剂盒
  • 商品编号: RTBK17-075

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    产品名称

    产品包装

    产品价格

    RTBK17-075

    通用反转录试剂盒

    100T/

    2600.00

    产品组成:

    组分

    50T

    100T

    M-MLV(200U/μL)

    50μL

    50μL×2

    5×M-MLV Buffer

    200μL

    400μL

    Oligo(dT)16(10μM)

    100μL

    200μL

    RNasin(40U/μL)

    25μL

    50μL

    dNTPs(10mM)

    50μL

    100μL

    RNase-free ddH2O

    1mL

    1mL×2

    保存:-20℃,避免反复冻融,有效期1年。

    注意事项:

    1. 用于cDNA合成反应的相关试剂和耗材尽可能用DEPC进行处理,并在高压灭菌后使用。有些试剂不能高压灭菌时,首先用经过灭菌的器具、水等配制溶液后,再将溶液进行过滤除菌处理。

    2. 试剂盒的各组分应在-20℃保存,避免反复冻融,有效期12个月。

    3.  RNA样品要避免反复多次冻融,应使RNA在冰浴中处于融化状态。

     

  • 使用说明:

    1. 在冰浴的无RNase的离心管中加入如下反应成分:

    成分

    用量

    模板

    总RNA

    1~5μg

    mRNA

    50~500ng

    引物

    Oligo(dT)16

    2μL

    基因特异性引物

    2pmol

    RNase-free ddH2O

    至14.5μL

    2.  70℃保温5min后迅速在冰上冷却2min,简短离心收集反应液后加入以下各组分:

    成分

    用量

    5×M-MLV Buffer

    4μL

    dNTPs

    1μL

    RNasin

    0.5μL

    M-MLV

    1μL

    3. 42℃温浴60min,如果是用随机引物,请先将离心管置25℃温浴10min,再42℃温浴60min。

    4. 95℃加热5min终止反应,置冰上进行后续实验或-20℃保存。

    5. 若用于后续PCR扩增,用RNase-free ddH2O将反应体系稀释到50μL,取2~5μL作为PCR反应模板。

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